中國GMP第一章 總則 第三條

本規(guī)范作為質(zhì)量管理體系的一部分，是藥品生產(chǎn)管理和質(zhì)量控制的基本要求，旨在最大限度地降低藥品生產(chǎn)過程中污染、交叉污染以及混淆、差錯等風(fēng)險，確保持續(xù)穩(wěn)定地生產(chǎn)出符合預(yù)定用途和注冊要求的藥品。

中國藥典2015年版四部通則 <1106>

控制菌檢查法系用于在規(guī)定的試驗條件下，檢查供試品中是否存在特定的微生物。……供試品檢出控制菌或其他致病菌時，按一次檢出結(jié)果為準(zhǔn)，不再復(fù)試。

中國藥典2015年版四部通則 <1107>

本限度標(biāo)準(zhǔn)所列的控制菌對于控制某些藥品的微生物質(zhì)量可能并不全面，因此，對于原料、輔料及某些特定的制劑，根據(jù)原輔料及其制劑的特性和用途、制劑的生產(chǎn)工藝等因素，可能還需要檢查其他具有潛在危害的微生物。

其他具有潛在危害的微生物是什么？ 在超過藥典標(biāo)準(zhǔn)中控制菌范圍之外的微生物會有一個新的名稱:不可接受微生物（Objectionable Microorganisms）。

判斷某種微生物是否是不可接受微生物時需要結(jié)合不同的角度和標(biāo)準(zhǔn)進行評估，包括分離微生物的描述（準(zhǔn)確鑒定、分析致病性、分析特性及常見來源等）、分離微生物的載荷、產(chǎn)品給藥途徑、產(chǎn)品特性、用藥人群等綜合分析。

圖1 不可接受微生物風(fēng)險評估決策樹（來源：PDA）

圖2 與產(chǎn)品召回、非無菌制劑引起的感染及臨床感染相關(guān)的常見微生物種類（來源：PDA）
 

在FDA召回的非無菌產(chǎn)品中，洋蔥伯克霍爾德菌（B.cepacia）污染是涉及召回次數(shù)最多的微生物污染召回事件，在2004-2011年FDA召回事件中的不可接受微生物，占三分之一的污染微生物為洋蔥伯克霍爾德菌（Burkholderia cepacia）。

圖3 2004-2011年FDA召回事件中的不可接受微生物

   最開始，洋蔥伯克霍爾德菌并未被列入USP的控制菌檢查范圍內(nèi)，它對藥品的潛在威脅性是在2018年9月底舉行的PDA/FDA會議中被提出。目前，USP<60> MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS—TESTS FOR BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX已于2019年12月1日生效，正式將洋蔥伯克霍爾德復(fù)合體納入了USP控制菌檢查項目。
 

 

洋蔥伯克霍爾德菌

   洋蔥伯克霍爾德菌群（Burkholderia cepacia complex , BCC ），是一類隸屬于β-變形菌綱，伯克霍爾德菌目，伯克霍爾德菌科，伯克霍爾德菌屬的，表型近似，基因存在差異，環(huán)境中普遍的革蘭氏陰性菌的總稱 。

洋蔥伯克霍爾德菌是自然界中分離獲得該菌群最常見代表菌株之一。

特點：革蘭氏陰性桿菌；代謝譜廣，對嚴(yán)苛環(huán)境的適應(yīng)能力強；自然環(huán)境及人類活動范圍中廣泛分布；可使動植物（包括人類）致病。

 

USP<60> 規(guī)定了使用TSB對樣品進行預(yù)培養(yǎng)，在BCSA培養(yǎng)基上劃線選擇性培養(yǎng)。洋蔥伯克霍爾德菌可能存在的指示特征為周圍黃色的綠棕色菌落，或者周圍粉紅色的白色菌落。挑選可疑菌進行鑒定。

關(guān)于BCSA瓊脂培養(yǎng)基

培養(yǎng)基原理：酪胨和酵母提取物提供豐富的氮源，乳糖和蔗糖提供兩種碳源，酚紅指示劑，結(jié)晶紫、萬古霉素抑制革蘭氏陽性菌的生長，慶大霉素抑制部分革蘭氏陰性菌的生長，多粘菌素B可抑制銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌等菌的生長。

目前，北京三藥針對洋蔥伯克霍爾德菌的檢驗開發(fā)了兩種培養(yǎng)基，洋蔥伯克霍爾德菌選擇性瓊脂基礎(chǔ)（符合USP）和BCC培養(yǎng)基基礎(chǔ)以及對應(yīng)的配套試劑，歡迎各位老師咨詢交流。